液相色譜標(biāo)準(zhǔn)品不出峰或者出兩個峰的原因分析

　　色譜標(biāo)準(zhǔn)品不出峰或者出兩個峰是怎么回事
　　情況一：HPLC測定槲皮素和奈酚時,按照文獻(xiàn)將色譜條件設(shè)定為檢測波長360nm,柱溫30度,流速1ml/min,流動相是甲醇-0.2%磷酸溶液（45：55）.標(biāo)準(zhǔn)品用液相色譜甲醇超聲溶解定容,微孔濾膜過濾后注入液相色譜儀,但是就是看不見峰，文獻(xiàn)上槲皮素在該條件下是10.3mim出峰,奈酚在系統(tǒng)條件下13.67min出峰.把測定時間設(shè)定為30min,但在30min中內(nèi)色譜標(biāo)準(zhǔn)品沒有任何峰出現(xiàn)。
　　情況二：用的衍生試劑是異硫氰酸苯酯（PITC）,流動相a是醋酸鈉溶液，流動相b是乙腈溶液。檢測條件：色譜柱：C18-AQ柱，柱溫25℃；流動相：甲醇：水=5:95；流速：1ml/min；紫外檢測器，檢測波長：280nm，進(jìn)樣量：10ul。做液相色譜谷氨酸色譜標(biāo)準(zhǔn)品總是出兩個分不開的峰是什么原因？
　　色譜標(biāo)準(zhǔn)品不出峰或者出兩個峰分析原因：
　　1、不同的色譜柱,保留差異會很大。建議是：將甲醇的比例增大,比如70：30,再根據(jù)主峰的保留時間調(diào)整比例,直到分離結(jié)果滿意。
　　2、標(biāo)準(zhǔn)品選用的溶劑溶解不適合，或者溶劑對樣品溶解過程中出現(xiàn)異構(gòu)化。
　　3、如果用到衍生劑可能是因為衍生劑衍生不夠*，或者衍生劑降解或者變質(zhì)。
　　4、使用的檢測器不適合于分析。
　　5、有可能是色譜柱污染，你可以再生柱子；
　　6、可以適當(dāng)調(diào)整流動相的pH;
　　7、提高色譜柱柱溫；
　　8、色譜標(biāo)準(zhǔn)品采用梯度洗脫方式。